Reorganisation testikulärer Strukturen bei In-vitro-kultivierten Zellen aus dem humanen adulten normogonadotropen Hoden mit vollständiger Spermatogenese

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Reorganisation testikulärer Strukturen bei In-vitro-kultivierten Zellen aus dem humanen adulten normogonadotropen Hoden mit vollständiger Spermatogenese. / von Kopylow, Kathrein; Schlatt, Stefan; Schulze, Wolfgang; Salzbrunn, Andrea; Spiess, Andrej-Nikolai.

In: J Reprodmed Endokrinol, Vol. 13, No. 4, 08.09.2016, p. 151.

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title = "Reorganisation testikul{\"a}rer Strukturen bei In-vitro-kultivierten Zellen aus dem humanen adulten normogonadotropen Hoden mit vollst{\"a}ndiger Spermatogenese",
abstract = "Einleitung: Morphogenetische Dynamiken vonIn-vitro-kultivierten Hodenzellen sind ausRatte und Maus bekannt [1–5]. Anhand vonZellkulturversuchen mit prim{\"a}r kultiviertenTestiszellen transsexueller M{\"a}nner wurden{\"a}hnliche Ergebnisse auch f{\"u}r den humanenHoden gezeigt [Mincheva et al., unpublished].Methodik: Aggregatfreie Zellsuspensionenaus kleinen Hodenbiopsien normogonadotroperPatienten mit vollst{\"a}ndiger Spermatogenese(n = 3) wurden bei 35 °C in unbeschichteten96-well-Plastik-Zellkulturplattenserumfrei unter Zusatz von Chemokinen f{\"u}rmindestens 80 Tage kultiviert. Die Gr{\"o}{\ss}enmessungder zellul{\"a}ren Cluster erfolgte alle1–3 Tage.Ergebnisse: Zellul{\"a}re Aggregate waren anZellkulturtag 6 nachweisbar, runde Zellclustervermehrt ab Tag 8. Ab Tag 13 war die Ansiedlungder Cluster auf Zellen, die morphologischperitubul{\"a}ren Testis-Zellen {\"a}hnelten,zu beobachten. Au{\ss}erdem wurden um Clusterherumgelagerte Spermatogonien-{\"a}hnlicheZellen sichtbar. Um Tag 19 kam es zur Clustervergr{\"o}{\ss}erung,h{\"o}chstwahrscheinlich durchFusionsprozesse einzelner Aggregate und/oder Rekrutieren zus{\"a}tzlicher Zellen. Parallelwar das br{\"u}ckenartige „Auswachsen“ der unterenZellschicht zwischen den Clustern zueinem „Stra{\ss}en“- bzw. „Schienen“-{\"a}hnlichenSystem zu verzeichnen. Entlang dieser Str{\"a}ngekonnte sp{\"a}ter die Ann{\"a}herung der Clustermit nachfolgenden fusionsartigen Prozessenfestgestellt werden, bei denen elongierte oderzunehmend dreidimensionale Strukturen generiertwurden. Die Gr{\"o}{\ss}en der verschiedenenClustertypen waren ansteigend von denanf{\"a}nglich detektierten Aggregaten zu densp{\"a}ter entstandenen Strukturen. In einer Zellkulturmit humanem Serum entstandene Formationenentsprachen in ihrer Gr{\"o}{\ss}e denClustertypen aus der serumfreien Zellkulturbedingung.Schlussfolgerungen: Zwischen somatischenZellen und Keimzellen des adulten normogonadotropenmenschlichen Hodens sind inder Zellkultur Interaktionen m{\"o}glich. Hierbeientstandene zellul{\"a}re Cluster k{\"o}nnten geeigneteBedingungen f{\"u}r die Vermehrung vonSpermatogonien bzw. spermatogonialenStammzellen liefern sowie die Voraussetzungf{\"u}r eine In-vitro-Spermatogenese darstellen.F{\"o}rderung: Gef{\"o}rdert durch DFG: KO 4769/2-1.Literatur:1. Gassei K, et al. Initiation of testicular tubulogenesisis controlled by neurotrophic tyrosine receptor kinasesin a three-dimensional Sertoli cell aggregation assay.Reproduction 2008; 136: 459–69.2. Pan F et al. Effects of nanostructures and mouseembryonic stem cells on in vitro morphogenesis of rattesticular cords. PLoS One 2013; 8: e60054.3. Reuter K et al. Reassembly of somatic cells andtesticular organogenesis in vitro. Tissue Cell 2013;46: 86–96.4. M{\"a}kel{\"a} JA, et al. Reconstruction of mouse testicularcellular microenvironments in long-term seminiferoustubule culture. PLoS One 2014; 9: e90088.5. Yokonishi T et al. In vitro reconstruction of mouseseminiferous tubules supporting germ cell differentiation.Biol Reprod 2013; 89: 1–6.",
author = "{von Kopylow}, Kathrein and Stefan Schlatt and Wolfgang Schulze and Andrea Salzbrunn and Andrej-Nikolai Spiess",
year = "2016",
month = sep,
day = "8",
language = "Deutsch",
volume = "13",
pages = "151",
journal = "J Reprodmed Endokrinol",
issn = "1810-2107",
publisher = "Krause und Pachernegg GmbH",
number = "4",

}

RIS

TY - JOUR

T1 - Reorganisation testikulärer Strukturen bei In-vitro-kultivierten Zellen aus dem humanen adulten normogonadotropen Hoden mit vollständiger Spermatogenese

AU - von Kopylow, Kathrein

AU - Schlatt, Stefan

AU - Schulze, Wolfgang

AU - Salzbrunn, Andrea

AU - Spiess, Andrej-Nikolai

PY - 2016/9/8

Y1 - 2016/9/8

N2 - Einleitung: Morphogenetische Dynamiken vonIn-vitro-kultivierten Hodenzellen sind ausRatte und Maus bekannt [1–5]. Anhand vonZellkulturversuchen mit primär kultiviertenTestiszellen transsexueller Männer wurdenähnliche Ergebnisse auch für den humanenHoden gezeigt [Mincheva et al., unpublished].Methodik: Aggregatfreie Zellsuspensionenaus kleinen Hodenbiopsien normogonadotroperPatienten mit vollständiger Spermatogenese(n = 3) wurden bei 35 °C in unbeschichteten96-well-Plastik-Zellkulturplattenserumfrei unter Zusatz von Chemokinen fürmindestens 80 Tage kultiviert. Die Größenmessungder zellulären Cluster erfolgte alle1–3 Tage.Ergebnisse: Zelluläre Aggregate waren anZellkulturtag 6 nachweisbar, runde Zellclustervermehrt ab Tag 8. Ab Tag 13 war die Ansiedlungder Cluster auf Zellen, die morphologischperitubulären Testis-Zellen ähnelten,zu beobachten. Außerdem wurden um Clusterherumgelagerte Spermatogonien-ähnlicheZellen sichtbar. Um Tag 19 kam es zur Clustervergrößerung,höchstwahrscheinlich durchFusionsprozesse einzelner Aggregate und/oder Rekrutieren zusätzlicher Zellen. Parallelwar das brückenartige „Auswachsen“ der unterenZellschicht zwischen den Clustern zueinem „Straßen“- bzw. „Schienen“-ähnlichenSystem zu verzeichnen. Entlang dieser Strängekonnte später die Annäherung der Clustermit nachfolgenden fusionsartigen Prozessenfestgestellt werden, bei denen elongierte oderzunehmend dreidimensionale Strukturen generiertwurden. Die Größen der verschiedenenClustertypen waren ansteigend von denanfänglich detektierten Aggregaten zu denspäter entstandenen Strukturen. In einer Zellkulturmit humanem Serum entstandene Formationenentsprachen in ihrer Größe denClustertypen aus der serumfreien Zellkulturbedingung.Schlussfolgerungen: Zwischen somatischenZellen und Keimzellen des adulten normogonadotropenmenschlichen Hodens sind inder Zellkultur Interaktionen möglich. Hierbeientstandene zelluläre Cluster könnten geeigneteBedingungen für die Vermehrung vonSpermatogonien bzw. spermatogonialenStammzellen liefern sowie die Voraussetzungfür eine In-vitro-Spermatogenese darstellen.Förderung: Gefördert durch DFG: KO 4769/2-1.Literatur:1. Gassei K, et al. Initiation of testicular tubulogenesisis controlled by neurotrophic tyrosine receptor kinasesin a three-dimensional Sertoli cell aggregation assay.Reproduction 2008; 136: 459–69.2. Pan F et al. Effects of nanostructures and mouseembryonic stem cells on in vitro morphogenesis of rattesticular cords. PLoS One 2013; 8: e60054.3. Reuter K et al. Reassembly of somatic cells andtesticular organogenesis in vitro. Tissue Cell 2013;46: 86–96.4. Mäkelä JA, et al. Reconstruction of mouse testicularcellular microenvironments in long-term seminiferoustubule culture. PLoS One 2014; 9: e90088.5. Yokonishi T et al. In vitro reconstruction of mouseseminiferous tubules supporting germ cell differentiation.Biol Reprod 2013; 89: 1–6.

AB - Einleitung: Morphogenetische Dynamiken vonIn-vitro-kultivierten Hodenzellen sind ausRatte und Maus bekannt [1–5]. Anhand vonZellkulturversuchen mit primär kultiviertenTestiszellen transsexueller Männer wurdenähnliche Ergebnisse auch für den humanenHoden gezeigt [Mincheva et al., unpublished].Methodik: Aggregatfreie Zellsuspensionenaus kleinen Hodenbiopsien normogonadotroperPatienten mit vollständiger Spermatogenese(n = 3) wurden bei 35 °C in unbeschichteten96-well-Plastik-Zellkulturplattenserumfrei unter Zusatz von Chemokinen fürmindestens 80 Tage kultiviert. Die Größenmessungder zellulären Cluster erfolgte alle1–3 Tage.Ergebnisse: Zelluläre Aggregate waren anZellkulturtag 6 nachweisbar, runde Zellclustervermehrt ab Tag 8. Ab Tag 13 war die Ansiedlungder Cluster auf Zellen, die morphologischperitubulären Testis-Zellen ähnelten,zu beobachten. Außerdem wurden um Clusterherumgelagerte Spermatogonien-ähnlicheZellen sichtbar. Um Tag 19 kam es zur Clustervergrößerung,höchstwahrscheinlich durchFusionsprozesse einzelner Aggregate und/oder Rekrutieren zusätzlicher Zellen. Parallelwar das brückenartige „Auswachsen“ der unterenZellschicht zwischen den Clustern zueinem „Straßen“- bzw. „Schienen“-ähnlichenSystem zu verzeichnen. Entlang dieser Strängekonnte später die Annäherung der Clustermit nachfolgenden fusionsartigen Prozessenfestgestellt werden, bei denen elongierte oderzunehmend dreidimensionale Strukturen generiertwurden. Die Größen der verschiedenenClustertypen waren ansteigend von denanfänglich detektierten Aggregaten zu denspäter entstandenen Strukturen. In einer Zellkulturmit humanem Serum entstandene Formationenentsprachen in ihrer Größe denClustertypen aus der serumfreien Zellkulturbedingung.Schlussfolgerungen: Zwischen somatischenZellen und Keimzellen des adulten normogonadotropenmenschlichen Hodens sind inder Zellkultur Interaktionen möglich. Hierbeientstandene zelluläre Cluster könnten geeigneteBedingungen für die Vermehrung vonSpermatogonien bzw. spermatogonialenStammzellen liefern sowie die Voraussetzungfür eine In-vitro-Spermatogenese darstellen.Förderung: Gefördert durch DFG: KO 4769/2-1.Literatur:1. Gassei K, et al. Initiation of testicular tubulogenesisis controlled by neurotrophic tyrosine receptor kinasesin a three-dimensional Sertoli cell aggregation assay.Reproduction 2008; 136: 459–69.2. Pan F et al. Effects of nanostructures and mouseembryonic stem cells on in vitro morphogenesis of rattesticular cords. PLoS One 2013; 8: e60054.3. Reuter K et al. Reassembly of somatic cells andtesticular organogenesis in vitro. Tissue Cell 2013;46: 86–96.4. Mäkelä JA, et al. Reconstruction of mouse testicularcellular microenvironments in long-term seminiferoustubule culture. PLoS One 2014; 9: e90088.5. Yokonishi T et al. In vitro reconstruction of mouseseminiferous tubules supporting germ cell differentiation.Biol Reprod 2013; 89: 1–6.

M3 - Konferenz-Abstract in Fachzeitschrift

VL - 13

SP - 151

JO - J Reprodmed Endokrinol

JF - J Reprodmed Endokrinol

SN - 1810-2107

IS - 4

ER -