Reorganisation testikulärer Strukturen bei In-vitro-kultivierten Zellen aus dem humanen adulten normogonadotropen Hoden mit vollständiger Spermatogenese
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Reorganisation testikulärer Strukturen bei In-vitro-kultivierten Zellen aus dem humanen adulten normogonadotropen Hoden mit vollständiger Spermatogenese. / von Kopylow, Kathrein; Schlatt, Stefan; Schulze, Wolfgang; Salzbrunn, Andrea; Spiess, Andrej-Nikolai.
In: J Reprodmed Endokrinol, Vol. 13, No. 4, 08.09.2016, p. 151.Research output: SCORING: Contribution to journal › Conference abstract in journal › Research
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TY - JOUR
T1 - Reorganisation testikulärer Strukturen bei In-vitro-kultivierten Zellen aus dem humanen adulten normogonadotropen Hoden mit vollständiger Spermatogenese
AU - von Kopylow, Kathrein
AU - Schlatt, Stefan
AU - Schulze, Wolfgang
AU - Salzbrunn, Andrea
AU - Spiess, Andrej-Nikolai
PY - 2016/9/8
Y1 - 2016/9/8
N2 - Einleitung: Morphogenetische Dynamiken vonIn-vitro-kultivierten Hodenzellen sind ausRatte und Maus bekannt [1–5]. Anhand vonZellkulturversuchen mit primär kultiviertenTestiszellen transsexueller Männer wurdenähnliche Ergebnisse auch für den humanenHoden gezeigt [Mincheva et al., unpublished].Methodik: Aggregatfreie Zellsuspensionenaus kleinen Hodenbiopsien normogonadotroperPatienten mit vollständiger Spermatogenese(n = 3) wurden bei 35 °C in unbeschichteten96-well-Plastik-Zellkulturplattenserumfrei unter Zusatz von Chemokinen fürmindestens 80 Tage kultiviert. Die Größenmessungder zellulären Cluster erfolgte alle1–3 Tage.Ergebnisse: Zelluläre Aggregate waren anZellkulturtag 6 nachweisbar, runde Zellclustervermehrt ab Tag 8. Ab Tag 13 war die Ansiedlungder Cluster auf Zellen, die morphologischperitubulären Testis-Zellen ähnelten,zu beobachten. Außerdem wurden um Clusterherumgelagerte Spermatogonien-ähnlicheZellen sichtbar. Um Tag 19 kam es zur Clustervergrößerung,höchstwahrscheinlich durchFusionsprozesse einzelner Aggregate und/oder Rekrutieren zusätzlicher Zellen. Parallelwar das brückenartige „Auswachsen“ der unterenZellschicht zwischen den Clustern zueinem „Straßen“- bzw. „Schienen“-ähnlichenSystem zu verzeichnen. Entlang dieser Strängekonnte später die Annäherung der Clustermit nachfolgenden fusionsartigen Prozessenfestgestellt werden, bei denen elongierte oderzunehmend dreidimensionale Strukturen generiertwurden. Die Größen der verschiedenenClustertypen waren ansteigend von denanfänglich detektierten Aggregaten zu denspäter entstandenen Strukturen. In einer Zellkulturmit humanem Serum entstandene Formationenentsprachen in ihrer Größe denClustertypen aus der serumfreien Zellkulturbedingung.Schlussfolgerungen: Zwischen somatischenZellen und Keimzellen des adulten normogonadotropenmenschlichen Hodens sind inder Zellkultur Interaktionen möglich. Hierbeientstandene zelluläre Cluster könnten geeigneteBedingungen für die Vermehrung vonSpermatogonien bzw. spermatogonialenStammzellen liefern sowie die Voraussetzungfür eine In-vitro-Spermatogenese darstellen.Förderung: Gefördert durch DFG: KO 4769/2-1.Literatur:1. Gassei K, et al. Initiation of testicular tubulogenesisis controlled by neurotrophic tyrosine receptor kinasesin a three-dimensional Sertoli cell aggregation assay.Reproduction 2008; 136: 459–69.2. Pan F et al. Effects of nanostructures and mouseembryonic stem cells on in vitro morphogenesis of rattesticular cords. PLoS One 2013; 8: e60054.3. Reuter K et al. Reassembly of somatic cells andtesticular organogenesis in vitro. Tissue Cell 2013;46: 86–96.4. Mäkelä JA, et al. Reconstruction of mouse testicularcellular microenvironments in long-term seminiferoustubule culture. PLoS One 2014; 9: e90088.5. Yokonishi T et al. In vitro reconstruction of mouseseminiferous tubules supporting germ cell differentiation.Biol Reprod 2013; 89: 1–6.
AB - Einleitung: Morphogenetische Dynamiken vonIn-vitro-kultivierten Hodenzellen sind ausRatte und Maus bekannt [1–5]. Anhand vonZellkulturversuchen mit primär kultiviertenTestiszellen transsexueller Männer wurdenähnliche Ergebnisse auch für den humanenHoden gezeigt [Mincheva et al., unpublished].Methodik: Aggregatfreie Zellsuspensionenaus kleinen Hodenbiopsien normogonadotroperPatienten mit vollständiger Spermatogenese(n = 3) wurden bei 35 °C in unbeschichteten96-well-Plastik-Zellkulturplattenserumfrei unter Zusatz von Chemokinen fürmindestens 80 Tage kultiviert. Die Größenmessungder zellulären Cluster erfolgte alle1–3 Tage.Ergebnisse: Zelluläre Aggregate waren anZellkulturtag 6 nachweisbar, runde Zellclustervermehrt ab Tag 8. Ab Tag 13 war die Ansiedlungder Cluster auf Zellen, die morphologischperitubulären Testis-Zellen ähnelten,zu beobachten. Außerdem wurden um Clusterherumgelagerte Spermatogonien-ähnlicheZellen sichtbar. Um Tag 19 kam es zur Clustervergrößerung,höchstwahrscheinlich durchFusionsprozesse einzelner Aggregate und/oder Rekrutieren zusätzlicher Zellen. Parallelwar das brückenartige „Auswachsen“ der unterenZellschicht zwischen den Clustern zueinem „Straßen“- bzw. „Schienen“-ähnlichenSystem zu verzeichnen. Entlang dieser Strängekonnte später die Annäherung der Clustermit nachfolgenden fusionsartigen Prozessenfestgestellt werden, bei denen elongierte oderzunehmend dreidimensionale Strukturen generiertwurden. Die Größen der verschiedenenClustertypen waren ansteigend von denanfänglich detektierten Aggregaten zu denspäter entstandenen Strukturen. In einer Zellkulturmit humanem Serum entstandene Formationenentsprachen in ihrer Größe denClustertypen aus der serumfreien Zellkulturbedingung.Schlussfolgerungen: Zwischen somatischenZellen und Keimzellen des adulten normogonadotropenmenschlichen Hodens sind inder Zellkultur Interaktionen möglich. Hierbeientstandene zelluläre Cluster könnten geeigneteBedingungen für die Vermehrung vonSpermatogonien bzw. spermatogonialenStammzellen liefern sowie die Voraussetzungfür eine In-vitro-Spermatogenese darstellen.Förderung: Gefördert durch DFG: KO 4769/2-1.Literatur:1. Gassei K, et al. Initiation of testicular tubulogenesisis controlled by neurotrophic tyrosine receptor kinasesin a three-dimensional Sertoli cell aggregation assay.Reproduction 2008; 136: 459–69.2. Pan F et al. Effects of nanostructures and mouseembryonic stem cells on in vitro morphogenesis of rattesticular cords. PLoS One 2013; 8: e60054.3. Reuter K et al. Reassembly of somatic cells andtesticular organogenesis in vitro. Tissue Cell 2013;46: 86–96.4. Mäkelä JA, et al. Reconstruction of mouse testicularcellular microenvironments in long-term seminiferoustubule culture. PLoS One 2014; 9: e90088.5. Yokonishi T et al. In vitro reconstruction of mouseseminiferous tubules supporting germ cell differentiation.Biol Reprod 2013; 89: 1–6.
M3 - Konferenz-Abstract in Fachzeitschrift
VL - 13
SP - 151
JO - J Reprodmed Endokrinol
JF - J Reprodmed Endokrinol
SN - 1810-2107
IS - 4
ER -